Cordblood Bank

Uzimanje krvi iz pupkovine

Mogućnost za uzimanje krvi iz pupkovine se javlja neposredno nakon rođenja dijeteta. Sakupljanje iz placente preko pupkovine vrši liječnik koji vodi porođaj ili primalja u rađaoni. Kada se dijete već rodilo, i neophodna pupkovina preko koje se hranilo i razvijalo unutar placente je presječena, javlja se prilika za sakupljanje krvi iz pupkovine. Naravno, sakupljanje krvi iz pupkovine ne utječe na postupak porađanja. Bilo da je riječ o prirodnom, materičnom porođaju, ili da je riječ o carskom rezu, postoji mogućnost za sakupljanje krvi iz pupkovine. Uzimanje krvi pupkovine iz placente se obavlja sa specijalnom, sterilnom vrećom za prikupljanje, koja je opremljena sa tvari protiv grušanja krvi. Sve je to osigurano u kompletu za prikupljanje krvi iz pupkovine koji je prilikom potpisivanja ugovora predat budućoj majci.

Broj matičnih stanica koje se nalaze u krvi iz pupkovine srazmjeran je sa količinom uzete krvi, zato jer čim se više krvi uzme iz pupkovine, veća je šansa za pronalaženje matičnih stanica. U prosjeku uspjeva uzimanje od oko 60-70ml krvi iz pupkovine, ali u boljim slučajevima ova količina može biti čak i 150-200ml. Količina krvi koja se može skupiti iz placente ovisi od mnogo činitelja, kao na primjer: broj tjedana trudnoće, veličina placente, da li je trudnoća s jednom bebom ili s blizancima, koliko brzo se odvaja placenta za vrijeme porođaja i sl. Ako za vrijeme porođaja ne dođe do drugih komplikacija, onda se sakupljanje krvi iz pupkovine vrpce može izvršiti na osnovu odluke liječnika, a to je rutinski postupak koji traje 3-5 minuta.

Ovaj postupak ne uzrokuje nikakvu bol, i zdravstveno ne predstavlja nikakav rizični čimbenik ni za rođeno dijete, a ni za majku. Iz placente koja se smatra (opasnim) biološkim otpatkom, spašavaju se matične stanice od uništenja. Prikupljenu krv iz pupkovine treba do prijenosa u laboratorij čuvati na temperaturi između 4 -25 stupnjeva, jer je ovo optimalna toplina za stanice. Stanice je potrebno čuvati od ektremnih temperatura ispod +4 oC i iznad +25 oC.

Obrada i smrzavanje krvi iz pupkovine

Nakon porođaja i prikupljanja krvi pupkovine, u roku od 36 sati počinje obrada prenošenjem u laboratorij Instituta KRIO (u Budimpešti ili u Miškolcu). Obrada i smrzavanje se vrši po NETCORD međunarodnim odredbama. Znači, smrznute i pohranjene matične stanice su i po međunarodnim mjerilima pogodne za korištenje i presađivanje.

U laboratoriju se u okviru izuzetno strogog, sterilnog sustava obavlja obrada prikupljene krvi iz pupkovine. Tijekom ovog postupka, Institut KRIO pokušava dobiti što je više moguće stanica s jezgrom, da ih smrzne uz očuvanje životnih funkcija, i da ih dugoročno pohrani. Korisne matične stanice se zapravo nalaze u stanicama s jezgrom, u krvi iz pupkovine. Laboratorij ima najmodernije, kompjuterski upravljane uređaje za odvajanje matičnih stanica. Ako količina (volumen) prikupljene krvi iz pupčanika to dozvoli, (iznad 70 ml), onda se naravno obavlja smanjenje volumena i odvajanje po odredbama „NETCORD“ i „EAFCBB“. U izvjesnim količinskim graničnim okvirima, (40-70 ml) zbog odvajanja bi gubitak stanica bio srazmjerno visok, zbog toga se u ovom intervalu smrzava ukupna količina krvi.

Iz ovog razloga se pristigla krv iz pupkovine najprije izmjeri, i odredi se njezin volumen. Po međunarodnim odredbama, ispod volumena od 40 ml se pohrana ne preporuča, jer se u ovom slučaju u uzorku može naći srazmjerno malo matičnih stanica. Mjerenje prati analiza krvi i obrada. Osim navedenog, obavljaju se i potrebna mikrobiološka ispitivanja (uzgoj bakterija, gljivica, dijagnoza virusnih oboljenja), iz krvi uzete iz placente (posteljice).

Ovakva priprava stanica se obrađuje sa specijalnom zaštitnom tvari. Ova tvar štiti matične stanice s jezgrom od razarajućeg utjecaja smrzavanja, štiti od pretvaranja vodenih molekula koji se nalaze u stanicama u kristale. Ovako matične stanice mogu sačuvati svoju životnost i u duboko smrznutom stanju, teorijski, na neograničeno vrijeme. Pripravak koji sadrži stanice s jezgrom (matične stanice) se postavlja u specijalnu vreću za smrzavanje, nakon čega se vreća postavlja u metalnu kazetu. Ako volumen uzorka krvi iz pupkovine to dozvoli, moguće je smrznuti dvije, pa čak i tri vreće (jedinice), koje se pohranjuju međusobno odvojeno.

Od svakog uzorka krvi iz pupkovine novorođenog dijeteta, uzima se i smrzava još po 4 komada ampula za testiranje od po 1,5 ml. Krv iz pupkovine koja se nalazi u ovim ampulama može se koristiti za potrebna ispitivanja u slučaju presađivanja, bez potrebe za odmrzavanjem uzorka iz vreće ili uzimanjem krvi od dijeteta. Za ova ispitivanja se ukazuje potreba (takozvana HLA analiza) ako matičnu stanicu ne koristi vlasnik matične stanice, dakle ne koristi se za liječenje dijeteta, već za lječenje rođaka (brata, roditelja, djeda ili bake, itsl.), ili se presađuje u drugi, tuđ organizam.

Nakon navedenog, pripravak se prenosi u hladnjak za duboko smrzavanje koji je kompjuterski kontroliran. Ovdje se u određenim fazama vrši duboko smrzavanje matičnih stanica na temperaturu između -120oC i -196 oC. Nakon ove faze, krv iz pupkovine se prenosi u trenutno najmoderniji sustav dušične pare, u takozvani „vapour phase“ sustav pohrane. Ovaj sustav pohrane, u poređenju s hladnjacima za duboko smrzavanje koji se koriste u kućanstvu, ima minimalnu potrebu za električnom energijom. Ali čak i bez struje, još tjednima para tekućeg dušika (-196 oC) osigurava temperaturu između -120oC i -196 oC koja je potrebna za sigurnu pohranu matičnih stanica.

Za svako dijete koje pohranjuje krv iz pupkovine dajemo uvjerenje o kvaliteti pripravaka matičnih stanica. Ovo uvjerenje sadrži osobne podatke koji se odnose na obradu, datum, oznake, način obrade, podatke o kakvoći i količini uzorka, i točno mjesto pohrane gdje se uzorak nalazi. Podaci uzorka o kakvoći (npr.: broj stanica s jezgrom) sadrži vrijedne podatke za liječnike koji se bave presađivanjem, transplantacijom matičnih stanica, jer broj stanica s jezgrom određuje polje uporabe uzorka krvi iz pupkovine za potrebe liječenja.